使用尼康 LV100 顯微鏡觀察西藥結(jié)晶顆粒（如藥物結(jié)晶），需結(jié)合儀器操作規(guī)范與結(jié)晶樣本特性，以下為詳細(xì)操作流程及注意事項(xiàng)：

一、樣本制備

固體藥物直接制片

取少量結(jié)晶顆粒（如西藥粉末）置于載玻片中央，滴 1-2 滴蒸餾水或生理鹽水，輕輕蓋上蓋玻片，避免氣泡（可用濾紙吸去多余液體）。

適用場景：觀察晶體原始形態(tài)（如針狀、片狀、棱柱狀）及團(tuán)聚情況。

混懸液 / 溶解后制片

若藥物為混懸劑（如阿莫西林顆粒），搖勻后取上清液滴于載玻片；若為固體溶解后析出結(jié)晶，取少量溶液自然晾干或低速離心后制片。

適用場景：檢測溶液中結(jié)晶析出情況（如藥物穩(wěn)定性問題，參考摘要 3）。

染色輔助觀察（可選）

對透明晶體（如無機(jī)鹽），可滴加 0.1% 亞甲藍(lán)或碘液染色，增強(qiáng)對比度（需根據(jù)藥物性質(zhì)選擇染色劑，避免破壞晶體結(jié)構(gòu)）。

二、尼康 LV100 顯微鏡操作步驟

開機(jī)與對光

打開電源，調(diào)節(jié)光源亮度至低（避免強(qiáng)光損傷樣本），旋轉(zhuǎn)聚光鏡光圈至中等開度。

切換至低倍物鏡（10×），轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋使物鏡距載玻片約 2cm，左眼觀察目鏡，同時調(diào)節(jié)反光鏡（自然光用平面鏡，弱光用凹面鏡，參考摘要 7、9），直至視野明亮均勻。

低倍鏡定位

放置樣本，移動載物臺推進(jìn)器，找到晶體密集區(qū)域（優(yōu)先選擇邊緣或稀疏處，避免重疊干擾）。

緩慢調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋至晶體模糊成像，再微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋至清晰（參考摘要 4、6 的調(diào)焦技巧）。

高倍鏡觀察

切換至高倍物鏡（40×），僅用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋微調(diào)（避免壓碎玻片）。觀察晶體細(xì)節(jié)：

形態(tài)：記錄形狀（如立方體、針狀、樹枝狀）、邊緣是否光滑（判斷純度，鋸齒狀可能含雜質(zhì)）。

大小：估算粒徑（結(jié)合目鏡測微尺，或通過軟件自動測量，參考摘要 1 的圖像分析）。

排列：是否規(guī)則排列（提示結(jié)晶度高），有無團(tuán)聚或無定形沉淀（提示穩(wěn)定性問題）。

注：若需更高分辨率（如觀察細(xì)微晶格），可使用油鏡（100×），滴加香柏油后微調(diào)（摘要 7、9）。

光源與對比度優(yōu)化

晶體反光強(qiáng)時，降低光圈或使用偏光片（尼康 LV100 可選配），突出晶體輪廓。

透明晶體可調(diào)節(jié)聚光鏡高度，利用暗場照明增強(qiáng)立體感（參考摘要 6 的光線調(diào)節(jié)技巧）。

三、結(jié)晶分析與判斷

藥物結(jié)晶特征參考

正常結(jié)晶：形態(tài)規(guī)則（如阿司匹林的片狀、磺胺類的針狀），大小均勻，無雜質(zhì)（參考摘要 1 的結(jié)晶性質(zhì)分析）。

異常結(jié)晶：大量細(xì)小顆粒、無定形沉淀或異物（可能提示藥物降解、純度不足，如摘要 3 的阿莫西林案例）。

注意事項(xiàng)

避免污染：制片工具需清潔，防止灰塵干擾（尤其注射劑結(jié)晶檢測）。

動態(tài)觀察：若需分析結(jié)晶生長或溶解過程（如穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)），可固定視野后定時拍照（結(jié)合 LV100 的延時攝影功能）。

結(jié)果記錄：拍攝典型圖像，標(biāo)注放大倍數(shù)、日期，附文字描述（如 “大量棱柱狀結(jié)晶，伴少量無定形顆粒"）。

四、常見問題處理

圖像模糊：檢查物鏡是否污染（用擦鏡紙清潔），或載玻片是否平整。

晶體反光過強(qiáng)：降低光源亮度，或嘗試斜射光照明（旋轉(zhuǎn)聚光鏡角度）。

結(jié)晶難分辨：對比空白載玻片背景，確認(rèn)是否為藥物晶體（排除玻片劃痕或雜質(zhì)）。

總結(jié)

尼康 LV100 憑借高分辨率物鏡（如 Plan Apo 系列）和靈活的光路調(diào)節(jié)，可清晰呈現(xiàn)西藥結(jié)晶的形態(tài)學(xué)特征。通過規(guī)范制片、分步聚焦和光源優(yōu)化，不僅能鑒別結(jié)晶類型，還可輔助判斷藥物純度、穩(wěn)定性（如是否析出影響療效的大顆粒結(jié)晶，參考摘要 2、3）。結(jié)合圖像分析軟件，更可量化晶體參數(shù)，為藥物研發(fā)或質(zhì)量控制提供直觀數(shù)據(jù)。